Skip to content

Dializa otrzewnowa i nabłonkowe do mezenchymalnego przejścia komórek śródbłonka ad 7

4 tygodnie ago

460 words

Transdyferencjacja komórek śródbłonka i wczesne wyrażanie czynnika transkrypcyjnego ślimaka. Komórki uzyskane z ludzkiej sieci i wycieki z dializy otrzewnowej (dwie próbki na typ transdróżnicowanej komórki) analizowano pod kątem ekspresji RNA ślimaka i e-kadheryny (mRNA) (Panel A) za pomocą RT-PCR. Komórki nerkowe stymulowano 0,5 ng transformującego czynnika wzrostu .1 (TGF-.1) na mililitr i 2 ng interleukiny-1. na mililitr w różnym czasie, a ekspresję mRNA ślimaka i e-kadheryn analizowano za pomocą RT-PCR (Panel B) . Monowarstwy komórek omentalnych zostały zranione i pozostawione do migracji, a ekspresję ślimaka i mRNA e-kadheryny analizowano metodą PCR w różnym czasie (Panel C). Ostatnio czynnik transkrypcyjny zwany ślimakiem został opisany jako silny represor ekspresji e-kadheryn i induktor przejścia między nabłonkiem a mezenchymalnym.21-23 Aby określić, czy ekspresja ślimaka była związana ze zmianami fenotypowymi obserwowanymi w komórkach błonę otrzewnową u pacjentów poddawanych ciągłej ambulatoryjnej dializie otrzewnowej, zastosowano analizę RT-PCR w celu oszacowania ekspresji tego czynnika transkrypcyjnego, a także kadheryny E, w komórkach międzybłonka pochodzących z wycieku i sieci (Figura 4A). W komórkach omentalnych nie wykryto sygnału informacyjnego RNA ślimaka (mRNA), natomiast obserwowano progresywny wzrost ekspresji mRNA ślimaka w preparatach ścieków, gdy postępował proces transdyferencjacji. Dramatyczna regulacja w dół ekspresji mRNA e-kadheryny była już widoczna w komórkach wypływu, które miały wygląd kostki brukowej, co jest zgodne ze zmniejszeniem ekspresji białka E-kadheryny (Figura 2A).
Stymulacja hodowanych komórek śródbłonka za pomocą TGF-.1 plus interleukina-1. ujawniła szybką i przejściową indukcję mRNA ślimaka. MRNA e-kadheryny zmalało do czasu pierwszej obserwacji i pozostało prawie niewykrywalne nawet po zmniejszeniu transkrypcji ślimaka (figura 4B). Podobnie, po gojeniu się ran in vitro obserwowano przejściową indukcję mRNA ślimaka, co prawdopodobnie odpowiadało procesowi przejściowemu w komórkach obok rany. Ponieważ większość komórek nie uczestniczyła w procesie gojenia się rany, nie zaobserwowano regulacji w dół kadheryny E w całej populacji (Figura 4C).
Wzmocnienie integryny .2 i nabycie fenotypu wędrownego
Rycina 5. Rycina 5. Wzmocnienie ekspresji integryny .2 i regulacji ekspresji tetraspanin w procesie międzypólnicowania śródbłonka. Całkowite lizaty komórek różnych preparatów komórek mezotelialnych poddano sekwencyjnie analizie Western blot z przeciwciałami przeciwko integrynie .2 lub integryną .3 i przeciwciałami monoklonalnymi przeciwko tubulinie (panel A). Sygnał chemiluminescencyjny został określony ilościowo, znormalizowany w odniesieniu do ekspresji tubuliny i związany z poziomami ekspresji w komórkach omentalnych. Wykres pokazuje średnie (. SE) poziomy ekspresji w czterech różnych próbkach. Panel B pokazuje histogramy cytometrii przepływowej różnych preparatów komórek barwionych dla integryny .1, integryny .2, integryny .3, CD9 lub CD151
[przypisy: dyżur aptek stargard, wybielanie zębów zamość, rezonans magnetyczny głowy cennik ]
[przypisy: masaż limfatyczny cena, psychoterapia bielsko, yaz ulotka ]

0 thoughts on “Dializa otrzewnowa i nabłonkowe do mezenchymalnego przejścia komórek śródbłonka ad 7”